A dor orofacial é toda a dor associada a tecidos moles e mineralizados da cavidade oral e da face e tem aumentado o interesse por novas substâncias extraídas de produtos naturais para prevenção e combate desta condição. A bromelina é uma enzima proteolítica encontrada no abacaxi, Ananas comosus L. Merril (Bromeliaceae), em maior concentração no caule e fruto. Existem estudos abordando a ação antinociceptiva da bromelina, entretanto os mecanismos envolvidos foram pouco explorados. Foi então proposto como objetivo avaliar o efeito antinociceptivo orofacial da bromelina em zebrafish (Danio rerio) adulto. Inicialmente foi avaliado o impacto da bromelina na atividade locomotora, bem como a toxicidade aguda. A nocicepção aguda foi induzida por cinamaldeído, capsaicina, mentol, salina ácida ou glutamato em zebrafish (n=8/grupo) tratados (20 µL; intraperitoneal) com bromelina (3; 10 ou 30 mg/mL) ou veículo (solução salina a 0,9 %). Em experimentos subsequentes, os animais foram prétratados com HC- 030031, capsazepina, AMTB, amilorida ou cetamina para investigar o possível mecanismo de antinocicepção da bromelina. O envolvimento das fibras C aferentes também foi investigado utilizando zebrafish adultos dessensibilizados pela administração repetida de capsaicina. Em todos os experimentos foram incluídos grupos Naive (n=8/cada). Foi realizando docking molecular entre a bromelina e os canais TRPV1 e TRPM8. A bromelina não alterou atividade locomotora dos animais, não apresentou efeito tóxico e preveniu a resposta nociceptiva induzida por cinamaldeído, capsaicina, mentol, salina ácida e glutamato. O efeito antinociceptivo da bromelina foi resistente ao pré-tratamento com HC-030031 (antagonista TRPA1), amilorida (antagonista ASIC) e cetamina (antagonista NMDA), mas não ao pré-tratamento com capsazepina (antagonista TRPV1) e AMTB (antagonista TRPM8). A antinocicepção promovida pela bromelina também foi inibida pela dessensibilização com capsaicina. Em conformidade com os experimentos in vivo, o estudo de docking molecular indicou que a bromelina pode interagir com os canais TRPV1 e TRPM8. O presente estudo demonstrou o potencial farmacológico da bromelina como um inibidor da nocicepção orofacial, ação esta que parece ser modulada pelos canais TRPV1 e TRPM8. Em conjunto, os resultados sugerem que a bromelina é um promissor fitofármaco para o tratamento da dor orofacial.

Palavras-chave: Dor orofacial; bromelina; zebrafish adulto, TRPs. Ver menos

Orofacial pain is all pain associated with soft and mineralized tissues of the oral cavity and face and there has been increasing interest in new substances extracted from natural products to prevent and combat this condition. Bromelain is a proteolytic enzyme found in pineapple, Ananas comosus L. Merrill (Bromeliaceae), in highest concentration in the stem and fruit. There are studies addressing the antinociceptive action of bromelain, however the mechanisms involved have been little explored. The objective was then proposed to evaluate the orofacial antinociceptive effect of bromelain in adult zebrafish. Initially, the impact of bromelain on locomotor activity, as well as acute toxicity, was evaluated. Acute nociception was caused by cinnamaldehyde, capsaicin, menthol, acid saline or glutamate in zebrafish (n=8/group) treated (20 µL; intraperitoneal) with bromelain (3; 10 or 30 mg/mL) or vehicle (0.9% saline). In subsequent experiments, animals were pretreated with HC-030031, capsazepine, AMTB, amiloride or ketamine to investigate the possible antinociception mechanism of bromelain. The involvement of afferent C fibers was also investigated using adult zebrafish desensitized by repeated administration of capsaicin. In all experiments, Naïve groups were included (n=8/each). Molecular docking was carried out between bromelain and the TRPV1 and TRPM8 channels. Bromelain did not alter the locomotor activity of the animals, did not present a toxic effect and prevented the nociceptive response caused by cinnamaldehyde, capsaicin, menthol, acid saline and glutamate. The antinociceptive effect of bromelain was resistant to pretreatment with HC-030031 (TRPA1 antagonist), amiloride (ASIC antagonist) and ketamine (NMDA antagonist), but not to pretreatment with capsazepine (TRPV1 antagonist) and AMTB (TRPM8 antagonist). The antinociception promoted by bromelain was also inhibited by desensitization with capsaicin. In line with in vivo experiments, the molecular docking study indicated that bromelain can interact with TRPV1 and TRPM8 channels. The present study demonstrated the pharmacological potential of bromelain as an inhibitor of orofacial nociception, an action that appears to be modulated by the TRPV1 and TRPM8 channels. Taken together, the results suggest that bromelain is a promising phytopharmaceutical for the treatment of orofacial pain.

Keywords: Orofacial pain; bromelain; adult zebrafish, TRPs. Ver menos